描述
一種可以分離/純化存在于革蘭氏陰性菌外壁上的LPS的產品
• 革蘭氏陰性菌中LPS的分離/純化
• 酚水法提取LPS
• 有效去除蛋白質和核酸等污染物
• 高效、簡單的LPS萃取產品
•提取LPS的整個過程在長達60分鐘內完成
LPS提取試劑盒是一種可以分離/純化存在于革蘭氏陰性細菌外細胞壁上的LPS的產品。一般來說,革蘭氏陰性細菌除了在細胞包膜外層中的磷脂和蛋白質外,還具有稱為脂多糖(LPS)的單獨結構,并且每種細菌具有不同的特征。已知這種LPS在細菌生長和存活中起重要作用,特別是在宿主和寄生蟲之間的相互作用中。此外,LPS被認為與免疫反應密切相關,例如在應用膿毒性休克時通過分泌內毒素引起外周血管塌陷,并且對于毒性病理生理學反應也很重要。每種細菌的LPS提取模式是不同的,通過這種方式,細菌被系統地分離。如前所述,細菌內毒素通常存在于革蘭氏陰性細菌的外壁上,并且在細菌活著時不表達,而是在細菌增殖或死亡時通過破壞細胞壁釋放到外部。天然內毒素由LPS,蛋白質和磷脂組成。它本質上非常穩定,耐熱,帶負電,分子量大(超過1,000,000道爾頓)。通常,用Trichloroacetic acid,丁醇或EDTA提取蛋白質以除去脂質相關蛋白質(LAP),并使用苯酚提取磷脂。通常,如果您嘗試提取LPS,則可以獲得每個細菌干重約1-4%的LPS。由于LPS提取試劑盒基于苯酚水法,因此它使細胞毒素中的蛋白質變性,并通過以水層和苯酚層之間的沉淀物形式使其變性來除去它。由于脂質由苯酚/氯仿級分分離,因此只能快速輕松地提取高LPS。
應用
01 液化石油氣的組成和結構研究
02 細菌的系統發育研究
03 抗生素靶點研究
04 LPS抑制藥物設計研究
05 碳水化合物抗原免疫反應研究
套件內容
裂解緩沖液 100 毫升 x 1 歐元
純化緩沖液 80 毫升 x 1 歐元
技術參數
低磷脂提取的產量
應變液化石油酸產量(微克)蛋白質污染*
鼠傷寒沙門氏菌 200 ~ 400 < 0.2微克
腸炎鏈球菌 90 ~ 250 < 0.2微克
鱗毛蕨 150 ~ 450 < 0.2微克
大腸桿菌(野生型) 220 ~ 490 < 0.2微克
大腸桿菌 (O:055) 260 ~ 510 < 0.2微克
大腸桿菌 (O:111) 220 ~ 500 < 0.2微克
大腸桿菌 (O:1) 180 ~ 380 < 0.2微克
大腸桿菌 (O:2) 180 ~ 380 < 0.2微克
使用LPS提取試劑盒從OD600的每個G(-)菌株中提取LPS后,使用Purpald測定法對提取的LPS進行定量,結果證實了上述提取效率。另一方面,使用我們的SMART微BCA測定試劑盒觀察到蛋白質的存在,并確認污染小于0.2μg。
從各種菌株中提取的LPS的條帶圖案
泳1 :鼠傷寒沙門氏菌 2 : 腸炎
南道 3 : 大腸桿菌 (O055) 泳4 : 大腸桿菌 (O111)
泳道 5 : 南鎵草泳道 6 : S. 腸炎
泳7 : 鼠傷寒沙門氏菌 泳8 : 大腸桿菌 (野生大腸桿菌)
泳9 : 大腸桿菌 (O111) 泳道 10 : 大腸桿菌 (O2)
由于從各種類型的革蘭氏陰性細菌中提取LPS的SDS-PAGE后銀染色,根據作為多聚體存在的LPS的特征和多聚體的數量,觀察到梯形圖形式的條帶圖案。觀察到模式存在差異。
產品詳情
名稱 LPS Extraction Kit
編號 17141
品牌 intronbio