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Ludger Tag聚糖的全甲基化

　更新時間：2021-11-23　點擊量：1064


Ludger Tag 聚糖的全甲基化

MALDI-MS 分析聚糖可提供質量組成數據，并且比 UHPLC 技術更快（平均一個樣品只需 1 分鐘的數據采集時間），但唾液酸化聚糖通常更難分析，因為唾液酸部分不穩定. 全甲基化是用于 MALDI-MS 檢測的碳水化合物衍生化的流行技術，因為它提高了電離效率，穩定了唾液酸并有助于連鎖分析研究。然而，用于全甲基化的傳統技術速度慢、勞動強度大，因此不適合高通量樣品分析。

我們開發了一種簡單易用的 LudgerTag 試劑盒，用于全甲基化聚糖，LT-PERMET-VP96。該套件可用于使用手動方法或適用于液體處理機器人的自動方法處理 1-96 個樣品。它適用于 N-或 O-聚糖，一旦全甲基化，它們可以通過 MALDI-TOF-MS 或 LC-MS 進行分析。

我們已經驗證了這項技術，并證明糖譜分析數據是可靠的，可與金標準 HILIC UHPLC 方法相媲美。該技術已用于 Ludger 的一系列高通量研究（使用自動全甲基化樣品制備時間低于 5.5 小時，可處理 96 個樣品）。

聚糖標準品

Ludger 擁有一系列適用于不同應用的系統適用性標準、過程控制和參考標準，包括唾液酸、單糖、聚糖分析和表征的分析。我們提供各種未標記的 N-聚糖 (N)、O-聚糖 (O)、寡糖、糖蛋白/糖肽和聚糖文庫標準品。此外，我們的標準品目錄還包括用 2-氨基苯甲酰胺 (2-AB)、2-AA（2-氨基苯甲酸）、普魯卡因酰胺、8-氨基芘-1,3 熒光標記的各種 N- 和 O- 聚糖標準品,6-三磺酸 (APTS) 和全甲基化聚糖標準品。我們還提供 Ludger BioQuant 品牌下的定量聚糖和糖肽標準品。

精心設計的分析策略的一個關鍵組成部分是包含標準。下面的標準品表顯示了哪些標準品可用于唾液酸、單糖、N-聚糖和/或 O-聚糖分析過程中的最佳實踐。
這些分為以下幾類；

  1. 系統適用性標準使分析人員能夠測試分析系統（例如色譜、質譜和/或 CE）的整體功能并評估其是否適合其預期用途。


  2. 流程標準或流程控制用于驗證部分或整個流程是否正常運行。糖分析中的過程標準有四個主要類別：釋放、標記、釋放后標記和外切糖苷酶測序


  3. 參考標準允許通過比較來表征。這可以通過將未知物的色譜或電泳保留時間與結構已*表征的標準物的色譜或電泳保留時間直接比較來實現。此外，未知結構的主要分配可以通過將它們的 GU（葡萄糖單位）值（使用葡萄糖均聚物 (GHP) 標準獲得）與 GU 值在數據庫或文獻中的聚糖進行比較來完成。


  4. 定量聚糖標準品用于確定樣品中分析物的絕對量。它們還可用于量化流程的效率。


  • N-聚糖命名表


可用的 N-聚糖存在于大多數生物和生物制藥糖蛋白中，可分為以下幾類：低聚甘露糖，以及巖藻糖基化、唾液酸化和二、三和四天線的復合聚糖。聚糖可作為具有游離還原末端（醛醇）或化學衍生的分子獲得。N-聚糖的常見化學衍生物是熒光標記的糖苷（2-AA、2-AB、APTS、普魯卡因酰胺等）或全甲基化聚糖。

天然聚糖通常適用于使用帶有熒光標簽的還原胺化或進行全甲基化或乙基酯化等衍生化的標記方法的過程控制。


A4 家族聚糖


NA4 聚糖 (A4G4)

CN-NA4-10U（大?。?0μg）和-20U（大小：20μg）

含有末端半乳糖殘基的四觸角 N-聚糖。
m/z：2370.8566

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NGA4 聚糖 (A4)

CN-NGA4-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的四觸角 N-聚糖。
m/z：1722.6453

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A3 家族聚糖


A3 聚糖 (A3G3S3)

CN-A3-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

含有末端唾液酸殘基的三天線 N-聚糖。
m/z：2879.0106

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NA3 聚糖 (A3G3)

CN-NA3-10U（大?。?0μg）和-20U（大小：20μg）

含有末端半乳糖殘基的三角 N-聚糖。
m/z：2005.7244

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NGA3 聚糖 (A3)

CN-NGA3-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的三觸角 N-聚糖。
m/z：1519.5659

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A2F 家族聚糖


A2F 聚糖（FA2G2S2、G2FS2）

CN-A2F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

雙天線 N-聚糖，包含末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z：2368.8409

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A1F 聚糖 (FA2G2S1, G2FS1)

CN-A1F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

含有末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z：2077.7455

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NA2F 聚糖（FA2G2、G2F）

CN-NA2F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

雙天線 N-聚糖，包含末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z：1786.6501

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NGA2F 聚糖 (FA2, G0F)

CN-NGA2F-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

雙天線 N-聚糖，包含末端 N-乙酰氨基葡糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化。
m/z：1462.5444

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FA2G1 聚糖 (G1F)

CN-FA2G1-10U（大?。?0μg）和-20U（大?。?0μg）

含有一個末端半乳糖殘基和核心 GlcNAc 上的巖藻糖基化的雙觸角 N-聚糖。
m/z：1624.5973

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A2 家族聚糖


A2 聚糖（A2G2S2、G2S2）

CN-A2-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

含有末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z：2222.7830

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A1 聚糖（A2G2S1、G2S1）

CN-A1-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

含有一個末端唾液酸殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z：1931.6876

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A2G1 聚糖 (G1)

CN-A2G1-20U（大?。?0μg）

含有一個末端半乳糖殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z：1478.5393

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NA2 聚糖 (A2G2, G2)

CN-NA2-10U（大?。?0μg）和-20U（大小：20μg）

含有末端半乳糖殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z：1640.5922

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NGA2 聚糖 (A2, G0)

CN-NGA2-10U（尺寸：10µg）和-20U（尺寸：20µg）

含有末端 N-乙酰氨基葡糖殘基的雙天線 N-聚糖。
m/z：1316.4865

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低聚甘露糖聚糖


Man-9 聚糖

CN-MAN9-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

具有 9 個甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z：1882.0634

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Man-8 聚糖

CN-MAN8-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

具有 8 個甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z：1720.5919

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Man-7 聚糖

CN-MAN7-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

具有 7 個甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z：1558.5391

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Man-6 聚糖

CN-MAN6-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

具有 6 個甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z：1396.4863

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Man-5 聚糖

CN-MAN5-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

具有 5 個甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z：1234.4334

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M3N2 聚糖 (Man-3)

CN-M3N2-10U（尺寸：10μg）和-20U（尺寸：20μg）

具有 3 個甘露糖殘基的低聚甘露糖 N-聚糖。
m/z：910.3278