bellbrooklabs Transcreener cGAMP說明書
bellbrooklabs Transcreener® cGAMP cGAS
Transcreener cGAMP cGAS分析法直接測量由環狀GMP-AMP合酶(cGAS,C6orf150、2'3'-cGAMP合酶)產生的環狀GMP-AMP (cGAMP)。通過測量cGAMP的產量,研究人員可以有效地確定 cGAS酶的活性。該測定法提供了一個強大的工具,可以篩選整個化合物庫中的cGAS調節劑,以 幫助找到針對cGAS-STING途徑的新療法。
真核細胞胞質溶膠中DNA的存在是感染或細胞損傷的指示,并且在I型干擾素(IFN)誘導的驅動下引發強烈的免疫反應。cGAS是細胞質中雙鏈DNA的非常靈敏的傳感器。DNA的結合激活了該酶,從而產生了*的環狀二核苷酸第二信使cGAMP,它充當STING(干擾素基因刺激劑)受體的激動劑,從而導致I型干擾素應答。
Transcreener cGAS分析法采用易于HTS使用,混合閱讀的格式。運行您的酶反應,添加 Transcreener試劑,然后閱讀板。該測定與96、384和1536孔格式兼容。
當使用標準曲線將原始數據轉換為cGAMP時,該測定法顯示線性。cGAS被雙鏈DNA激活,并需要ATP和GTP底物來生產cGAMP。
Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式篩選化合物庫。還可以使用該測定法進行隨訪SAR,從而輕松確定抑制劑的效價。
該測定法準確地證明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情況下,雙鏈DNA激活了產生cGAMP的酶。一個45個堿基對的ISD(干擾素刺激性DNA)和一個60個堿基對的HSV(單純皰疹病毒)DNA均可激活該酶。該測定法對cGAMP具有很高的親和力,即使存在其他核苷酸也可以檢測。
該測定顯示24小時以上的信號穩定性。這樣的印版穩定性對于大型的高通量篩選至關重要,由于大量樣品需要大量時間才能完成。
標準曲線包括ATP,GTP,dsDNA和cGAMP的滴定。在每個時間點讀取相同的板。
有興趣推進您的程序,但不想內部進行分析嗎?我們的科學家可以提供幫助!BellBrook的科學家將利用其豐富的生物化學和酶學專業知識與您合作,并加快您的cGAS計劃。
請填寫下面的表格。我們將迅速做出響應,以使對話進展順利,并了解我們如何提供幫助。我們保持事情分散,保密和專業。
供應商 | 儀器 | |
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TriStar²SLB 942 | ||
密特拉拉斯LB 943 | ||
Cytation™5 | ||
Cytation™3 | ||
Cytation™1 | ||
Synergy™H1 | ||
Synergy™2 / H4 / 4 | ||
Synergy™HTX | ||
Synergy™Neo 2 | ||
POLARstar ®歐米茄 | ||
FLUOSTAR ®歐米茄 | ||
PHERAstar ® FSX | ||
PHERAstar ®加/ FS | ||
CLARIOstar ® /加 | ||
分析師® GT / HT | ||
雙子座® XPS / EM | ||
的SpectraMax ® M2 / M2e的 | ||
的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3 | ||
的SpectraMax ®范式 | ||
的EnVision ® /的EnVision ® XCITE | ||
無限® M1000 / M1000Pro / Safire2™ | ||
無限® M200 | ||
無限® F500 | ||
無限® F200 /超進化 | ||
Spark™10M |
零件 | 筆記 |
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cGAMP抗體 | 對二核苷酸cGAMP具有特異性的抗體。 |
示蹤劑 | 當被置換時,取決于測定形式,可以在FP或TR-FRET中讀取熒光的變化。 |
停止并檢測緩沖區B,10X | 可以用于終止酶反應以終止終點讀數的緩沖液。 |
三磷酸腺苷 | ATP可用于酶反應和標準曲線。 |
GTP | GTP可用于酶反應和標準曲線。 |
cGAMP | cGAMP可用于創建標準曲線。 |
干擾素刺激DNA | ISD是用于激活cGAS酶的45 bp寡聚體。 |
零件 | 筆記 |
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cGAS酶 | 您可以直接通過BellBrook Labs購買活性cGAS酶 。 |
酶緩沖液 | 我們經常使用含有20mM TRIS(pH 7.5)中,5毫摩爾MgCl酶緩沖液2,0.01%的Brij-35和1%DMSO(測試化合物溶劑)。使用適合您的酶條件的緩沖液 |
檢測板 | 您可以直接通過BellBrook Labs購買測定板。
FP-需要一個具有非粘合表面的全黑色印版。我們建議康寧384孔板,目錄 #4514。 TR-FRET-需要具有無粘合表面的全白色板。我們建議使用康寧384孔板Cat。#4513 |
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貨號。 | 產品描述 | 價錢 |
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3024-1K | Transcreener cGAMP cGAS FP測定法(1,000測定法,384孔) | $ 798.00 |
3024-10K | Transcreener cGAMP cGAS FP測定法(10,000測定法,384孔) | $ 4,615.00 |
3024-100K | Transcreener cGAMP cGAS FP測定(10 X 10,000測定,384孔) | $ 23,075.00 |
3025-1K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(1,000測定,384孔) | $ 875.00 |
3025-10K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(10,000測定,384孔) | $ 4,989.00 |
3025-100K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(10 X 10,000測定,384孔) | $ 24,950.00 |
貨號。 | 產品描述 | 價錢 |
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2227 | 重組cGAS酶,活性的,人的,全長,10 µg | $ 399.00 |
2228 | 重組cGAS酶,活性的,人的,全長,100 µg | $ 1,398.00 |
*當以1.75μg/ mL(30 nM)使用時,包括用于各孔的足夠酶
貓。沒有。 | 產品描述 | 價錢 |
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3024-1K-B | 包括Transcreener cGAS FP Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶 | $ 1,275.00 |
3024-10K-B | 包括Transcreener cGAS FP Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶 | $ 6,670.00 |
3025-1K-B | 包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶 | $ 1,345.00 |
3025-10K-B | 包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶 | $ 6,995.00 |
貨號。 | 產品描述 | 價錢 |
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2233 | 康寧96孔黑色檢測板(#3686),3片裝(200+檢測) | $ 40.00 |
2229 | 康寧384孔黑色檢測板(#4514),3包(1,000多種檢測) | $ 45.00 |
2230 | 康寧384孔黑色檢測板(#4514),30包(10,000+檢測) | $ 400.00 |
貨號。 | 產品描述 | 價錢 | |
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2234 | 康寧96孔白色檢測板(#3642),3包(200多種檢測) | $ 40.00 | |
2231 | 康寧384孔白色檢測板(#4513),3包(1,000多種檢測) | $ 50.00 | |
2232 | 康寧384孔白色檢測板(#4513),30包(10,000+檢測) | $ 450.00 |