丁香五月婷婷综合在线观看_羞耻电影_华丽的外出 电影_一二三四视频免费观看影视在线_国产you女视频

歡迎進入上海起發實驗試劑有限公司!
技術文章
首頁 > 技術文章 > 利用Transcreener CD73檢測發現新型抑制劑

利用Transcreener CD73檢測發現新型抑制劑

 更新時間:2020-12-29 點擊量:1127

 

 

bellbrooklabs利用Transcreener CD73檢測發現新型抑制劑

Transcreener CD73檢測可測量由ecto-5'-核苷酸酶(也稱為5'-核苷酸酶,NT5E,分化簇73或CD73)產生的腺苷(ADO)。通過測量ADO的產量,研究人員可以有效地確定該酶的活性。該測定法為篩選CD73調節劑的整個化合物文庫提供了強大的工具,以幫助尋找疾病的新療法,例如癌癥。

該測定法使用偶聯酶,該偶聯酶使用CD73產生的ADO產生產物AMP和ADP。然后可以使用受信任的TranscreenerADP²分析組件來測量ADP。該試劑盒配有測量活性所需的所有檢測試劑。抑制劑篩選測定試劑盒中不包括CD73酶。

CD73是嘌呤能信號傳導的重要信使

外源核苷酸是與細胞膜結合的酶,具有外部定向的活性位點,可將核苷酸代謝為核苷,對于維持免疫穩態至關重要。CD39將ATP和ADP水解為AMP。CD73將AMP進一步加工成腺苷,從而對許多疾病產生重大影響。近的研究表明,腺苷在腫瘤微環境中的免疫抑制中起著關鍵作用,而外切核苷酸酶正成為有希望的免疫腫瘤學靶標。了解更多有關使用TranscreenerAMP²測定法靶向CD39的信息。

嘌呤能信號

檢測腺苷以測量CD73的酶活性

 
Transcreener CD73檢測示意圖
 
 

 

 

 

查看預先錄制的網絡研討會-Transcreener CD73分析:利用核苷酸檢測來測量腺苷

這次演講的重點 是在基礎研究和藥物發現中使用Transcreener®ADP 2分析法測量腺苷。涵蓋的主題包括:

  • 開發用于測量CD73酶活性的偶聯測定
  • 建立高通量篩選條件
  • 設置屏幕
  • 運行劑量響應曲線,重點是數據分析
 

應用領域

  • 測量CD73的酶活性
  • 篩選CD73抑制劑的復合文庫
  • 量化抑制劑效能(IC 50)
  • 抑制劑選擇性分析

特征

  • 未標記腺苷的檢測
  • 易于使用,同質,一步式
  • 初始速度條件下的穩健分析Z'> 0.7
  • 遠紅外熒光讀數程度地減少了化合物干擾
  • 一種安全的非放射性方法

易于使用,混合閱讀,HTS就緒分析

Transcreener CD73測定法采用易于HTS使用的混合讀取格式。運行您的酶反應,添加Transcreener試劑,然后閱讀板。該測定與96、384和1536孔格式兼容。

初始速度下腺苷的檢測

當原始數據轉換為使用標準曲線生成的腺苷時,該測定法證明了線性。

人CD73酶滴定

CD73酶滴定

線性響應

初始速度下的CD73

抑制劑篩選和執行SAR

Transcreener Assays設計用于以高通量格式篩選化合物庫。還可以使用該測定法進行隨訪SAR,從而輕松確定抑制劑的效價。

1600復合先導篩

CD73先導屏幕

使用CD73活性測定法篩選了來自Chembridge多樣性庫的子集。該子集的ah率為0.85%,而穩健的Z'為0.81。

獲取準確的劑量響應測量

PSB 12379效能CD73

在存在5 pM CD73的情況下PSB 12379的劑量反應曲線。該數據說明IC 50為19 nM。

可靠的分析可產生質量數據

使用優化的CD73反應條件進行的Z'測量表明存在可靠的分析方法。如此強大的數據對于大尺寸的高通量篩選至關重要,由于大量樣品難以完成。

在主要的多模閱讀器上驗證了遠紅FP讀數

供應商儀器
bioteklogoTriStar²SLB 942
密特拉拉斯LB 943
 
bioteklogoCytation™5
Cytation™3
Cytation™1
Synergy™H1
Synergy™2 / H4 / 4
Synergy™HTX
Synergy™Neo 2
 
BMGLABTECH徽標POLARstar ®歐米茄
FLUOSTAR ®歐米茄
PHERAstar ® FSX
PHERAstar ®加/ FS
CLARIOstar ® /加
 
MDS AT徽標分析師® GT / HT
雙子座® XPS / EM
的SpectraMax ® M2 / M2e的
的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3
的SpectraMax ®范式
 
珀金埃爾默標志的EnVision ® /的EnVision ® XCITE
 
tecanLogo無限® M1000 / M1000Pro / Safire2™
無限® M200
無限® F500
無限® F200 /超進化
Spark™10M

包含什么

 
零件筆記
ADP²抗體核苷酸ADP特異的抗體。
ADP追蹤器替換后,可以以FP分析格式讀取熒光的變化。
腺苷用于啟動CD73酶促反應并生成AMP / ADO標準曲線。
安培AMP用于創建ADO / AMP標準曲線,并用作CD73的底物。
三磷酸腺苷用作偶聯酶的底物。
耦合酶將ADO傳輸到ADP和AMP,從而允許通過TranscreenerADP²分析組件測量ADP。

您將需要什么

 
零件筆記
CD73酶我們已經成功使用了R&D Systems Cat。公司的純化重組CD73酶。#5795-EN。
酶緩沖液我們已經成功使用了pH 7.5的50 mM Tris,5 mM MgCl 2,1%DMSO和0.01%Brij-35緩沖液。
停止解決方案該測定設計為以動力學模式運行。該套件沒有停止解決方案。
檢測板可以直接通過BellBrook實驗室購買測定板。

 

FP-需要一個具有非粘合表面的全黑色印版。我們建議使用康寧384孔板Cat。#4514

 

Transcreener CD73檢測試劑盒

*對于定制或批量訂單(超過10,000口井),

 
貨號。產品描述價錢
3026-1 KTranscreener CD73 FP測定法(1,000測定法,384孔)$ 995
3026-10KTranscreener CD73 FP測定法(10,000測定法,384孔)$ 5,699

FP檢測板

 
貨號。產品描述價錢
2229康寧384孔黑色檢測板(#4514),3包(1,000多種檢測)$ 45
2230康寧384孔黑色檢測板(#4514),30包(10,000+檢測)$ 400
 

CD73檢測服務

有興趣推進您的程序,但不想內部進行分析嗎?我們的科學家可以提供幫助!BellBrook的科學家將利用其豐富的生物化學和酶學專業知識與您合作,并加快您的CD73程序。

分析開發服務

潛在客戶發現服務包括:

  • 抑制劑篩選–識別或確認靶標的活性。
  • 抑制劑效能分析–靶標和/或相關蛋白的劑量反應??焖買C 50結果。
  • 停留時間測量–使用“跳躍稀釋”酶法測定k off。
  • 作用機理研究–動力學分析定義了抑制方式。