Immunohistochemistry Workflow

vectorlabs免疫組織化學工作流程

自1976年以來，Vector Laboratories一直處于開發創新實驗室檢測試劑的前沿。該VECTASTAIN ^® ABC系統的建立我們在免疫組織化學（IHC）的和免疫細胞化學（ICC），而我們在這些領域仍然是一個值得信賴的名字。我們的產品以其高靈敏度，低背景，可靠性，可重復性和價值定價而*。我們提供許多不同的檢測系統，以適應廣泛的實驗重點。

為IHC分析選擇合適的試劑是優化方案的重要組成部分。在IHC工作流程的每個步驟中，Vector Laboratories都是您提供優質標簽和檢測產品的資源。

• 組織切片在玻片上的保留和粘附。
• 劃定并隔離各個部分以減少試劑使用量或進行離散處理。

抗原提取

用確定的pH和鹽溶液增加醛固定的制劑中的組織抗原性（“免疫反應性”）。醛固定（例如，福爾馬林）和石蠟包埋過程中的熱暴露相結合，可能會使表位難以檢出。在抗原回收過程中，將組織用緩沖溶液和高溫處理，這會導致暴露抗原以進行檢測的蛋白質構象變化。

第三步：淬火/阻止

使用封閉液減少或消除組織切片和細胞制劑上不需要的背景（非特異性）染色。非特異性染色可以由內源性酶或組織成分引起，包括內源性酶活性，Fc受體的存在或檢測試劑與組織或細胞蛋白和其他大分子的相互作用。根據陰性對照部分的結果選擇阻斷解決方案。

 第四步：

一抗/凝集素

使用特定的經過驗證的標記物鑒定和定位細胞或組織制劑中的目標蛋白抗原或糖蛋白部分。選擇一抗或凝集素時，請考慮組織種類和組織制備方法（例如固定），以確保與靶標的特異性結合。

 第五步：

二抗

選擇高純度和結合的檢測試劑，以滿足檢測條件，例如一抗種類，組織種類，靶標豐度和易用性（濃縮或即用型）。

 第六步：

三級試劑

如果需要，可以提高檢測靈敏度，以可視化弱或瞬時表達，上調或未知（例如基因敲入研究）的抗原。

 第七步:

底物/色原

使用酶特異性發色顯色劑可視化目標蛋白抗原及其細胞和/或細胞外定位以及相對表達水平。選擇符合您的顏色偏好并且與其他系統試劑兼容的酶底物（例如，復染，固定介質和其他底物，如果是多路復用的話）。

 第八步：

復染

使用對比核染色劑來闡明異質形態結構內的目標抗原信號。這有助于闡明組織中的細胞結構和特定的染色模式。選擇與您的酶底物形成對比并與底物和固定介質化學相容的復色（藍色，綠色或紅色）。

 第九步：

蓋玻片/安裝

保留目標抗原染色劑用于短期或無限期存儲和存檔。選擇與您的基材和復染都兼容的安裝介質。使用非水性安裝介質來安裝要存檔的幻燈片，或使用水性安裝介質來存儲長達幾年。