來源:組織溶梭菌
IUB:3.4.24.3
膠原酶原料認證
粗制膠原酶制劑包含兩種不同膠原酶的幾種同工型,一種巰基蛋白酶,梭菌蛋白酶,一種胰蛋白酶樣酶和一種氨肽酶。膠原蛋白水解和蛋白水解活性的這種結合有效地分解了細胞間基質,這是組織解離的重要部分。復合物的一個組分是水解酶,其優先降解天然膠原蛋白中Pro-Y-Gly-Pro序列中的Y-Gly鍵的螺旋區域,其中Y常見為中性氨基酸。這種切割產生易于進一步肽酶消化的產物。粗膠原酶受金屬螯合劑(例如半胱氨酸,EDTA或鄰菲咯啉)抑制,但不受DFP抑制。它也被大血漿糖蛋白α2-巨球蛋白抑制。鈣2+是酶活性所必需的。每種膠原酶的特定酶學特征與獲取研究細胞的組織(或與細胞的用途)相關,并且由于相關性,沃辛頓(Worthington)建立了幾種粗膠原酶類型:類型1、2、3和4。
• 1型粗膠原酶具有膠原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
• 2型具有較高的相對水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。
• 類型3包含低水平的二級蛋白酶。
• 4型胰蛋白酶的活性特別低,以限制對膜蛋白和受體的損傷。
•純化的膠原酶,代碼:CLSPA,具有小的次要蛋白水解活性和高膠原酶活性。
新! 無動物源類型AFA,AFB和AFC,STZ1和STZ2膠原酶源自在*不含動物成分的培養基中生長的培養物,并且設計用于必須防止引入潛在動物源性病原體的生物加工應用。二級蛋白酶的水平類似于1型和2型膠原酶。 • CLSAFA 是初的AF*,旨在具有類似于1型和2型膠原酶的膠原酶和二級蛋白酶。• CLSAFB的 膠原酶和酪蛋白酶活性高于CLSAFA。 • CLSAFC的 胰蛋白酶活性特別低,類似于4型膠原酶。 • STZ1&STZ2,0.22μm過濾的STEMxyme®AOF膠原酶/中性蛋白酶(Dispase®)混合物,用于原代和干細胞分離。 |
沃辛頓還提供預包裝形式的每種類型的0.22µm過濾制劑,用于直接重建并用于細胞分離和培養程序。酶類型和有效性與不同組織之間的相關性很好,但并不完美,部分原因是使用參數可變。不過,大多數研究人員認為,批量膠原酶的組織分型是有價值的服務。Worthington膠原酶和污染物測定的詳細說明可以在Worthington酶手冊中找到。另外,組織特異性參考和詳細的分離條件可以在《沃辛頓組織解離指南》中找到。
膠原酶測定法是Mandl的一種修飾,其中膠原酶與天然膠原一起溫育五小時,并且使用Moore and Stein,JBC,176,367,(1948)比色茚三酮法確定膠原分解的程度。釋放的氨基酸表示為每毫克膠原酶的微摩爾亮氨酸。
用途:粗膠原酶廣泛用于酶原代細胞分離和組織解離程序。大多數研究人員要么使用粗膠原酶制劑(例如1型,2型,3型和4型),要么采用色譜純化的膠原酶(代碼:CLSPA)。后者通常與第二種酶(例如彈性蛋白酶,透明質酸酶等)結合使用。為了獲得宜結果,必須針對要分離的組織量身定制蛋白水解活性的精確混合物。類型和有效性與不同組織之間的相關性很好,但并不完美,并且可能部分取決于使用和目標的參數以及批次之間的差異。有關更多信息,請參見膠原酶采樣程序信息。沃辛頓還出版了《組織解離指南》 其中提供了有關用于這些應用的酶的其他信息,以及許多細胞和組織類型的特定參考。
單位定義:一個單位在37°C,pH 7.5的5小時內從膠原蛋白中釋放出一微摩爾L-亮氨酸當量
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脫氧核糖核酸酶I(DP / D / DCLS / D2 / DPFF / DPRF)
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胰蛋白酶(TL / TRL / TRL3 / TRLS / TRTPCK)
胰蛋白酶抑制劑(LBI / OI / SI / SIC)
細胞分離優化系統(CIT)
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新生兒心肌細胞分離系統(NCIS)
木瓜蛋白酶解離系統(PDS / PDS2)
膠原酶,純化, 色譜純化。每毫克≤50個酪蛋白酶單位。以凍干粉形式提供。 儲存在2-8°C。 | ≥500單位/毫克干重 | CLSPA | 4千 | LS005275 | $ 83.00 |
10千 | LS005273 | $ 172.00 | |||
塊 | LS005277 | 查詢 | |||
NCIS膠原酶樣品瓶 NCIS試劑盒的組成部分。將該材料過濾0.22微米的膜,并在高壓滅菌的小瓶中凍干。用5毫升HBSS或等價物重構的小瓶可產生300單位/毫升膠原酶(代碼:CLSPA)的溶液。適用于細胞分離和培養應用。 儲存在2-8°C。 | ≥500單位/毫克干重 | CLSPANK | 1 vi | LK003240 | |
5 vi | LK003245 | ||||
HIS試劑盒中的膠原酶/彈性蛋白酶小瓶(CLSH)酶瓶,包含20,000單位的膠原酶(代碼:CLS-1)和30單位的彈性蛋白酶(代碼:ESL),通過0.22微米膜過濾并凍干。 儲存在2-8°C。 | 每小瓶≥20,000單位膠原酶/ 30單位彈性蛋白酶 | CLSH | 1 vi | LK002066 | |
5 vi | LK002067 | ||||
1型膠原酶 酶活性的原始平衡。每批都檢測膠原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性。建議用于上皮,肝,肺和腎上腺原代細胞分離。透析的凍干粉末。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥125個單位 | CLS-1 | 100毫克 | LS004194 | |
塊 | LS004193 | ||||
1克 | LS004196 | ||||
5克 | LS004197 | ||||
塊 | LS004200 | ||||
膠原酶,類型2 含有更高的梭菌蛋白酶活性。建議用于骨骼,心臟,肝臟,甲狀腺和唾液原代細胞的分離。提供為透析的凍干粉。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥125個單位 | CLS-2 | 100毫克 | LS004174 | |
1克 | LS004176 | ||||
5克 | LS004177 | ||||
塊 | LS004179 | ||||
3型膠原酶 次級蛋白水解污染物的活性較低,但具有典型的膠原酶活性。建議用于乳腺原代細胞分離。透析的凍干粉末。 儲存在2-8°C。 | ≥100個單位/毫克干重 | CLS-3 | 100毫克 | LS004180 | |
1克 | LS004182 | ||||
5克 | LS004183 | ||||
塊 | LS004185 | ||||
4型膠原酶 含有較低的胰蛋白酶活性水平,以限制對膜蛋白和受體的損害,但膠原酶的活性正常至高于正常水平。建議用于胰島初次分離。透析的凍干粉末。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥160單位 | CLS-4 | 100毫克 | LS004186 | |
1克 | LS004188 | ||||
5克 | LS004189 | ||||
塊 | LS004191 | ||||
5型膠原酶已 部分純化,以包含更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。透析的凍干粉末。 儲存在2-8°C。 | 每mg干重≥450單位 | CLS-5 | 100毫克 | LS005280 | |
1克 | LS005282 | ||||
5克 | LS005283 | ||||
塊 | LS005284 | ||||
6型膠原酶 制備后具有高于正常水平的膠原酶,FALGPA和酪蛋白酶活性,并設計為富含II型(col H)膠原酶。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥400單位 | CLS-6 | 100毫克 | LS005318 | |
500毫克 | LS005319 | ||||
2.5克 | LS005321 | ||||
塊 | LS005323 | ||||
7 型膠原酶與膠原酶1-4相比,具有比膠原酶1-4多4-5倍的膠原酶,FALGPA和酪蛋白酶活性,并具有中等的梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥1,000個單位 | CLS-7 | 100毫克 | LS005332 | |
500毫克 | LS005333 | ||||
2.5克 | LS005335 | ||||
塊 | LS005337 | ||||
1型膠原酶,過濾的1型 膠原酶(代碼:CLS-1),將其通過0.22微米的膜過濾并在小瓶中凍干。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥125個單位 | CLSS-1 | 50毫克 | LS004214 | |
5x50毫克 | LS004216 | ||||
1克 | LS004217 | ||||
2型膠原酶,過濾后的2型 膠原酶(代碼:CLS-2),將其通過0.22微米的膜過濾并在小瓶中凍干。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥125個單位 | CLSS-2 | 50毫克 | LS004202 | |
5x50毫克 | LS004204 | ||||
1克 | LS004205 | ||||
3型膠原酶,過濾的3型 膠原酶(代碼:CLS-3),將其通過0.22微米的膜過濾,并在小瓶中凍干,每個小瓶含50毫克。 儲存在2-8°C。 | ≥100個單位/毫克干重 | CLSS-3 | 50毫克 | LS004206 | |
5x50毫克 | LS004208 | ||||
4型膠原酶,過濾的4型 膠原酶(代碼:CLS-4),將其通過0.22微米的膜過濾,并在小瓶中凍干。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥160單位 | CLSS-4 | 50毫克 | LS004210 | |
5x50毫克 | LS004212 | ||||
1克 | LS004209 | ||||
5型膠原酶,過濾的 5 型膠原酶(代碼:CLS-5),將其通過0.22微米的膜過濾并在小瓶中凍干。 儲存在2-8°C。 | 每mg干重≥450單位 | CLSS-5 | 50毫克 | LS005286 | |
5x50毫克 | LS005287 | ||||
1克 | LS005288 | ||||
膠原酶CLSAFA無動物/ AF 在*不含動物成分的培養基中生長的培養物,設計用于必須防止引入動物源性病原體的生物加工應用。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥150單位 | 里昂 | 100毫克 | LS004152 | |
1克 | LS004154 | ||||
5克 | LS004156 | ||||
塊 | LS004158 | ||||
膠原酶,CLSAFA,過濾的 膠原酶,無動物/ AF(代碼:CLSAFA),將其通過0.22微米的膜過濾并凍干在小瓶中。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥150單位 | 里昂 | 50毫克 | LS004118 | |
5X50毫克 | LS004119 | ||||
膠原酶CLSAFB無動物/ AF 從*不含動物成分的培養基中生長的培養物中制備,專為必須防止動物源性病原體引入的生物加工應用而設計。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥300單位 | 里昂 | 100毫克 | LS004145 | |
1克 | LS004147 | ||||
5克 | LS004148 | ||||
塊 | LS004150 | ||||
膠原酶,CLSAFB,過濾的 膠原酶,無動物/ AF(代碼:CLSAFB),將其通過0.22微米的膜過濾并凍干在小瓶中。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥300單位 | CLSAFBS | 50毫克 | LS004124 | |
5x50毫克 | LS004125 | ||||
膠原酶CLSAFC無動物/ AF 從*沒有動物成分的培養基中生長的培養物中制備,并且設計用于必須防止引入動物源性病原體的生物加工應用。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥200個單位 | 里昂證券 | 100毫克 | LS004138 | |
1克 | LS004140 | ||||
5克 | LS004141 | ||||
塊 | LS004143 | ||||
膠原酶,CLSAFC,過濾的 膠原酶動物無/ AF(代號:CLSAFC),可通過0.22微米的膜過濾并凍干于小瓶中。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥200個單位 | 里昂證券 | 50毫克 | LS004130 | |
5x50毫克 | LS004131 | ||||
STEMxyme®1,膠原酶/中性蛋白酶(Dispase) 一種無動物/房顫 組織溶梭菌膠原酶(代碼:CLSAFB)和無動物源的芽孢桿菌中性蛋白酶的特殊組合,每毫克干重至少有250個CLS單位和1,000個酪蛋白酶單位。專為干細胞和其他原代細胞分離以及生物處理應用而設計,在這些應用中必須防止引入潛在的動物源性病原體。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥250CLS / 1,000 CAS單位 | STZ1 | 50毫克 | LS004106 | |
5x50毫克 | LS004107 | ||||
STEMxyme®2膠原酶/中性蛋白酶(Dispase) 動物無/ AF 組織溶梭狀芽孢桿菌 膠原酶(代碼:CLSAFB)和無動物源的多粘芽孢桿菌 中性蛋白酶的特殊組合,每毫克干重至少有250個CLS單位和2,000個酪蛋白酶單位。專為干細胞和其他原代細胞分離以及生物處理應用而設計,在這些應用中必須防止引入潛在的動物源性病原體。 儲存在2-8°C。 | 每毫克干重≥250CLS / 2,000 CAS單位 | STZ2 | 50毫克 | LS004112 | |
5x50毫克 | LS004113 |