biostatus DRAQ5說明書
DRAQ5™
DRAQ5™
適用于: FM , Flow Cyt , ICC/IF
DRAQ5™ 是一種細胞通透性的遠紅色熒光DNA染料,可與GFP或FITC等常用標記結合用于固定或非固定/活細胞。
與任何細胞滲透性DNA插入探針一樣,DRAQ5可能在長期檢測中抑制細胞分裂,并應進行任何效果測試。
DRAQ5染色可用于流式細胞術、活細胞成像和細胞分析,該染色劑與許多儀器平臺的標準協議高度兼容。
DRAQ5的化學名稱為1,5-雙-4,8-二羥基蒽-9,10-二酮。
DRAQ5染色的優點包括
-方便易用的水溶液
-快速進入活細胞,提供高水平的核歧視
-無光漂白效應
-可用于大多數細胞類型,真核和原核:哺乳動物,細菌,寄生蟲,植物等。
-流式細胞術中常用FITC/GFP+PE組合無需補償
-無需RNase處理
-DNA結合無熒光增強
-與臺式流式、激光掃描細胞儀、非紫外激光掃描和基于燈的共焦顯微鏡光學兼容
光譜特性:
激勵
647nm線宜(Ex大646nm)
488、514、568和633納米線,次優
雙光子激發(1047nm)和激發暗(700-850nm)
排放(取決于儀器):
-665nm至紅外線大681nm/697nm與dsDNA插層)
-與可見光范圍(如GFP和FITC)的小重疊
-Em.過濾器可包括695L、715LP或780 LP
濃度:5mm
Liquid
Store at +4°C. Do Not Freeze. Store In the Dark.
濃度
應用說明包括推薦的起始稀釋液;宜稀釋液/濃度應由終用戶確定。
阿伯
在分析濃度下使用FM。
流量循環1/1000-1/250。對于有核細胞的選通=5μM;對于細胞周期分析=20μM
商會/單項體育聯合會1/1000。對于基于細胞的分析、免疫熒光顯微鏡和細胞內WB=5μM
強烈建議每個研究者仔細確定濃度和標記條件,以便在感興趣的分析中獲得宜性能。有關應用程序的更多具體信息,請參閱協議手冊部分。
Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - DRAQ5™
用層粘連蛋白B1抗體核膜標記(ab16048)和α-微管蛋白抗體(DM1A)負載對照(ab7291)對HeLa細胞進行染色。細胞100%甲醇固定(5min),然后在1%牛血清白蛋白中孵育0.1%PBS吐溫1h,使細胞通透性增強,阻斷非特異性蛋白-蛋白質相互作用。然后在4C下用一級抗體(ab16048和ab7291)以1μg/ml孵育細胞。二級抗體是山羊對兔IgG-H&L的二級抗體(DyLight®488)、預吸附抗體(ab96899)(綠色)和山羊對小鼠IgG-H&L的二級抗體(DyLight®594)、預吸附抗體(ab96881)(紅色)室溫下1/250稀釋1h。將5μM DRAQ5加入二級抗體混合物中以標記細胞核DNA(假紫色)。
Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - DRAQ5™ (ab108410)
用β-連環蛋白抗體(ab16051)和α-微管蛋白抗體[DM1A]負載對照(ab7291)對HeLa細胞進行染色。細胞經100%甲醇固定(5min),然后在1%BSA和0.1%PBS-Tween中孵育1h,使細胞通透性增強,阻斷非特異性蛋白-蛋白質相互作用。然后用一級抗體(ab16051和ab7921)以1微克/毫升的濃度在4C下孵育細胞,二級抗體為山羊對兔IgG-H&L的多克隆二級抗體(DyLight®488)、預吸附(ab96899)(綠色)和山羊對兔IgG-H&L的多克隆二級抗體(DyLight®594)、預吸附(ab96899)(紅色)在室溫下稀釋1/250小時。將5μM DRAQ5添加到二級抗體混合物中以標記細胞核DNA(假橙色)。
Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - DRAQ5™ (ab108410)