Human Heparin Cofactor II
肝素輔因子II對凝血酶的抑制作用
凝血酶(IIa),肝素(HEP)和肝素輔因子II(HCII)通過隨機順序的雙反應機制相互作用形成三元復合物。肝素隨后從復合物中解離,因為凝血酶與肝素輔因子II形成共價復合物。
尺寸 | 100微克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ H 2O |
分子量 |
存儲 | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
復合 |
含量 | 凝血酶抑制 |
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保質期(正確存放) | 12個月 |
化學式 |
肝素輔助因子II(HCII)(肝素輔助因子A,抗凝血酶BM,硫酸皮膚素輔助因子,人leuserpin-2)是絲氨酸蛋白酶抑制劑(serpin)家族的單鏈糖蛋白(Mr = 65,600,10%碳水化合物)成員(1- 3)。肝素輔因子II的氨基酸序列分析揭示了3個潛在的N-糖基化位點和2個硫酸化的酪氨酸,它們位于NH2末端(4-6)附近的7個殘基的兩個內部重復序列中。血漿濃度估計為90 µg / ml(2)。
在凝血級聯反應中,肝素輔因子II通過在存在(k2 = 4.5x10 8 M -1 min -1)和不存在(k2 = 5.0x10 5 M -1 min -1)的情況下形成雙分子復合物來抑制凝血酶。)肝素(2,7-9)。該絡合物對變性劑穩定,并且基本上不可逆。除肝素外,多種聚陰離子化合物還可以促進HCII對凝血酶的抑制作用(3)。這些化合物中值得注意的是硫酸皮膚素,它能加速HCII對凝血酶的抑制作用,但不能加速抗凝血酶III的作用(1,6)。該功能已被用于開發基于血漿的肝素輔因子II特異性檢測方法。盡管HCII與其他絲氨酸蛋白酶抑制蛋白僅顯示約25%的序列同源性,但抑制凝血酶釋放的活性位點肽(COOH末端36個氨基酸)與凝血酶從抗凝血酶III(AT III)釋放的活性位點肽具有53%的同源性(4,9 )。HCII中的易斷裂鍵是Leu-Ser,這對于精氨酸特異性蛋白酶抑制劑而言是罕見的(4,9)。與AT III相比,HCII抑制的僅有凝血蛋白酶是凝血酶。HCII抑制的其他蛋白酶包括α-胰凝乳蛋白酶,中性粒細胞組織蛋白酶G和灰鏈霉菌蛋白酶B(3)。肝素輔因子II的主要生理作用可能仍有待發現。
肝素輔因子II是通過改良Griffith等人的方法(9),從新鮮的冷凍血漿中制備的。在SDS PAGE上評估純度,并根據肝素存在下對凝血酶的抑制作用來確定活性。HCII以50%(體積/體積)甘油/ H2O供應,可在-20°C下儲存。