ArcticZymes將利用其在北極海洋中的生物勘探活動,成為分子研究和診斷新型冷適應酶商業化的。
ArcticZymes 71800-100說明書
數量 | 產品信息 | 貨號 | 價錢 |
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T4 DNA連接酶包裝大?。?50 kU數量 | 包裝尺寸:250 kU濃度:5000 U / µl | #71800-202 | 25 歐元 |
不適用 | 包裝尺寸:根據協議濃度:根據協議 | #71800-100 | 詢價 |
T4 DNA連接酶是一種依賴ATP和Mg 2+的 dsDNA連接酶,可催化雙鏈DNA,雙鏈RNA和某些DNA / RNA雜交中3'-羥基和5'-磷酸末端之間的磷酸二酯鍵的形成。T4 DNA連接酶在平末端和內聚末端底物上均具有活性。
T4 DNA連接酶是一種依賴ATP和Mg 2+的 dsDNA連接酶,可催化雙鏈DNA,雙鏈RNA和某些DNA / RNA雜交中3'-羥基和5'-磷酸末端之間的磷酸二酯鍵的形成。T4 DNA連接酶在平末端和內聚末端底物上均具有活性。
這是T4 DNA連接酶的高質量(商業級)版本。T4 DNA連接酶在大腸桿菌中重組產生。ArcticZymes的T4 DNA連接酶經過了廣泛的測試,能夠污染DNase和RNase活性以及殘留的宿主細胞gDNA。
T4 DNA Ligas中的大腸桿菌 gDNA 污染 |
圖1:T4 DNA Ligases通常含有大腸桿菌 gDNA。分析了ArcticZymes的T4 DNA連接酶和四種市售的T4 DNA連接酶(5000個單位)是否污染了大腸桿菌 gDNA。在兩個商業連接酶中檢測到了大腸桿菌 gDNA。使用基于探針的qPCR分析,一式三份進行分析。 |
單位定義: 一個單位的定義是在總反應體積為5%的情況下,對λDNA的2322和2927 bp HindIII片段進行75%連接(5´DNA末端濃度為0.12 µM,300 µg / ml)所需的酶量。在16°C下30分鐘內于50 mM Tris-HCl(pH 7.5),10 mM MgCl 2、1 mM ATP和10 mM DTT中20μl。
一個Weiss單位約等于500 ArcticZymes單位。
滅活:通過在70°C下孵育10分鐘,可以*滅活T4 DNA連接酶。
該酶在提供的存儲緩沖液中在-20°C穩定1年以上。
該酶可耐受至少四個凍融循環(-80°C)而不會喪失活性。
ArcticZymes致力于提高產品質量。T4 DNA連接酶是在挪威的ISO 13485認證工廠生產的。
將10,000 U T4 DNA連接酶與超螺旋質粒(1 µg)在37°C下孵育4小時。瓊脂糖凝膠電泳未顯示出封閉的環狀DNA向有切口的DNA的任何轉化。
將10,000 U T4 DNA連接酶與M13 ssDNA(0.5 µg)在37°C下孵育4小時。瓊脂糖凝膠電泳未顯示任何可見的ssDNA降解跡象。
將10,000 U T4 DNA連接酶與3 H-dATP標記的ds或ssDNA(0.5 µg,500 bp)在37°C 下孵育4小時。對于任何一種底物,標記DNA的酸溶放射性均未超過空白測試。
將5000 U T4 DNA連接酶與2 kb RNA轉錄物(0.5 µg)在37°C下孵育4小時。瓊脂糖凝膠電泳未發現任何可見的RNA降解跡象。
在基于探針的qPCR分析中分析了5000 U T4 DNA連接酶,檢測了大腸桿菌中的23S核糖體亞基。無大腸桿菌的gDNA可以檢測(LOD:<3 大腸桿菌基因組拷貝)。