Bulldog Bio Inc.是一家混合型組織,結合了銷售子公司和服務分銷商的適合品質。我們*的營銷,銷售和支持產品線的方法使我們成為年輕公司在復雜和競爭激烈的美國市場中建立業務的理想合作伙伴。無論產品線的技術復雜程度如何,我們都專注于建立長期可持續發展的業務。
bulldog-bio ECFG21說明書
效率顯著高于PEG
我們的新設備提供通電結果
試管中體細胞的自發融合發生不到1,000,000次中的1次。雖然如果你是一個有生命的有機體,這是好的,但有時需要將細胞融合用于特殊應用。從歷*看,PEG等化學物質已被用于增加自發融合2或3個數量級; 或者,已經使用滅活病毒促進近端細胞融合至同等水平。近,利用AC和DC電場的方案進一步提高了細胞融合的效率 - 在某些情況下,多達25至100倍。
ECFG21采用新的固態電子設計,可提供強大的系統,并提供大量有用的反饋。兩相技術依賴于AC場以在鏈形成中端對端地物理對齊細胞。一旦進入它們的物理接觸,系統就會施加一系列DC脈沖來破壞質膜并誘導相鄰細胞的融合。在接下來的30分鐘內,每百個細胞中就有一個產生具有兩個細胞核的活細胞。原子核隨后融合,過程完成。只有ECFG21才能提供電壓和電流的實時反饋,以確保每個樣品都處于宜的細胞融合條件下。ECFG21控制AC到DC的切換時間,DC脈沖幅度和長度(包括方便的反極性選項),后融合AC電流用于維持端到端電池配置。它甚至可以手動控制直流脈沖 - 在顯微鏡下觀察細胞優化時非常有用。
對這個新系統的評論是巨大的。據報道,與化學和病毒方法相比,ECFG21可以更好地控制實驗條件。這是由于電場反饋; 系統可以實時確定離子條件是否不是融合的宜條件,因為高離子濃度會產生溶液的物理流和細胞鏈的破壞。電 - 細胞融合通常產生更穩定的雜交細胞系,部分原因在于電場固有的較低細胞毒性和該儀器的脈沖控制。結果往往更具可重復性和可重復性。不要忘記人的因素!在Bulldog,我們將與您密切合作,以優化您的結果,我們有多年的經驗。
新的研究前景
體細胞融合是一個棘手的過程,傳統上用于制備單克隆抗體的雜交瘤。這種經典技術將永生性骨髓瘤細胞系與產生脾的抗體產生B細胞融合。該雜交瘤細胞系將穩定地產生數月或數年的特異性單克隆抗體。細胞融合也被用于詢問有關基因表達和研究癌癥進展的基本問題。例如,已經將ES / EG細胞與T細胞融合以通過重編程多能干細胞來研究T細胞活化。該申請還能夠在非宿主細胞中擴增病毒顆粒,或者可以用于研究細胞如何分裂,并且已經被用于融合卵母細胞和體細胞的巨大成功。還有許多其他鮮為人知的應用,如融合酵母和霉菌細胞,
Hybridomas表達了對ECFG21的熱愛
,我們的客戶之一是Precision Antibody,多年來一直致力于開發基于經典PEG方法的高度優化的細胞融合方案。他們的程序導致為他們的客戶生產的抗體。當他們要求我們使用ECFG21來解決他們困難的抗原時,我們持謹慎樂觀的態度。事實上,當終結果統計出來時,每個人都被電融合技術提供的巨大改進所震撼。他們測試了三種不同類別的抗原,以及ECFG21改善其中產生的雜交瘤數量的能力。此外,他們計算了其中有多少實際上與抗原的反應性呈陽性。種是相當大的20kDa免疫抑制蛋白,用PEG制備雜交瘤,結果很好,但是甚至不能產生與抗原反應的單個陽性克隆。測試的第二和第三抗原都是短的(分別為8和17個氨基酸)和疏水的。他們再次產生了少量的雜交瘤,但是當使用PEG方法時,很少有陽性反應性克隆。使用ECFG21得到的雜交瘤數量為高出25倍至100倍。更令人印象深刻的是,與抗原呈陽性的雜交瘤克隆數量(這是重要的考慮因素),高出驚人的50倍至200倍以上。如果您的實驗室希望始終如一地生產特異性單克隆抗體,那么ECFG21不僅僅是好的 - 它是您明智的選擇。
體細胞核移植(SCNT)
ECFG21能夠使用去核卵母細胞對體細胞進行動物克隆再分泌。
四倍體胚胎互補
參見用于四倍體嵌合體生產的ECFG21,使用兩步克隆程序從癌細胞產生小鼠。
使用ECFG21的細胞融合效率比PEG高25-100倍
這三種抗原都被歸類為“難以獲得陽性克隆”。ECFG21在所有情況下都大大增加了克隆數量,并且至少在一個案例中,當傳統PEG方法沒有產生克隆時,導致陽性克隆。
1)使用的抗原:20kDa免疫抑制蛋白,具有高度同源性
2)使用的抗原:疏水性八肽
3)使用的抗原:高度疏水的17個氨基酸肽。
融合/ M: | 每1×10 6個 淋巴細胞產生的雜交瘤數 |
陽性克隆/ M: | 每1×10 6個 淋巴細胞產生針對抗原的單克隆抗體的克隆數 |
E w / P2: | 使用CUY497P2電極進行ECFG21電融合(高0.8 mL) |
E w / P8X10: | 使用CUY497P8X10電極進行ECFG21電融合(高6.4 mL) |
數據由精密抗體副總裁Jun Hayashi博士提供
AC | |
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電壓 | 0 - 80 Vrms |
頻率 | 1 MHz |
持續時間 | 0-99秒 |
融合后期限 | 0-99秒 |
后融合衰變模式 | 開關 |
在AC / DC之間暫停 | 5微秒 |
直流脈沖 | |
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脈沖波 | 方波 |
電壓 | 1 - 1500 V |
脈沖長度 | 1-99微秒 |
脈沖間隔 | 0.1 - 9.9秒 |
脈沖數 | 0 - 99 |
衰減率 | 0 - 99% |
極性切換 | 開關 |
輸出測量 | |
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電壓 | AC / DC |
當前 | AC / DC |
能量(J) | DC |
其他 | |
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阻抗測量 | 0.01 - 50kΩ |
操作模式 | 自動/手動 |
記憶 | 99個節目 |
電源要求 | AC100-240V 50 / 60Hz |
尺寸 | 386(W)×370(D)×121(H)mm |
重量 | 9公斤 |
保證 | 2年 |