目錄號:IQ479
£226.00
目標抗原
CD44
主要說明
小鼠抗CD44 [156-3C11]
目錄編號
IQ479
數量
0.1毫升
濃度
3.2mg / ml的
克隆
156-3C11
主辦
老鼠
同型
的IgG2a
免疫原
刺激人體白細胞
特異性
該抗體對CD44H分子的表位3具有特異性
物種反應性
人類,狒狒
純化
蛋白質A.
格式
PBS中純化的抗體+ 0.1%疊氮化na
應用
IHC-P,流式細胞
稀釋液
宜抗體稀釋應通過滴定確定,但作為指導,嘗試以1:10進行流式細胞術
參考
白細胞分型V,牛津大學出版社(1995)
數據庫
Entrez Gene:101008690狒狒
Entrez Gene:960人類
Omim:107269人類
SwissProt:P16070 Human
Unigene:502328人類
也稱為
LHR抗體; BA-1抗體; CD44抗體; CD44抗體; CD44抗原抗體; CD44分子(印度血型)抗體; CD44分子抗體; CD44_HUMAN抗體; CDw44抗體;細胞表面糖蛋白CD44抗體;硫酸軟骨素蛋白多糖8抗體;抗體CSPG8抗體; ECMR-III抗體; Epican抗體;細胞外基質受體III抗體; GP90淋巴細胞歸巢/粘附受體抗體; HCELL抗體;造血細胞E-和L-選擇素配體抗體;硫酸乙酰肝素蛋白多糖抗體; Hermes抗原抗體;歸巢功能和印度血型系統;抗體; HSA抗體; HUTCH-I抗體; HUTCH1抗體;透明質酸受體抗體; IN抗體; MC56抗體; MDU2抗體; MDU3抗體; MGC10468抗體; MIC4抗體; MUTCH1抗體; PGP-1抗體; PGP -I抗體; PGP1抗體;吞噬糖蛋白1抗體;吞噬糖蛋白I抗體
本產品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。
免疫熒光方案 - 甲醛固定
1.從Tcunit收集細胞,并用吸力從培養皿中取出培養基。
2.用1x PBS洗滌并取出。
3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預熱(37℃)對甲醛中孵育12分鐘。
4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5%Triton X-100中孵育5分鐘。
5.準備封閉試劑,這也是抗體稀釋劑。
6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
7.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
8.準備一抗(50μl/蓋玻片)和濕潤染色室。
9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并短暫風干。
10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準備二抗。
11.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數)
12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
13.用1x PBS洗滌細胞5次。
14.登上達皮。
溶液(染色當天新鮮制備)。
* 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
*封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
*固定液:3.5%對甲醛。
1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應為7.4。完成體積,d.H20至25ml,加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。
免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定
1.從TCunit收集細胞,并用吸力從培養皿中取出培養基。
2.用1x PBS洗滌并取出。
3.用冷甲醇:丙酮1:1在冰上固定細胞10分鐘。
4.制備阻斷試劑,這也是抗體的稀釋劑。
5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
6.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
7.準備一抗(50?l /蓋玻片)和濕染色室。
8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并風干約7分鐘。
9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時,在染色室中避光。在此期間準備二抗。
10.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數)
11。在室溫下,在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
12.用1x PBS洗滌細胞5次。
13.登上達皮。
溶液(染色當天新鮮制備)
* 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
*封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
*固定液:甲醇:丙酮1:1冰冷。
Western Blotting Protocol
1.將凝膠轉移到PDVF或硝酸纖維素膜上
2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
3.在洗滌緩沖液中沖洗
4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
8.檢測(例如ECL,Amersham根據制造商的說明)
洗滌緩沖液
PBS + 0.1%Tween 20
阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5%奶粉
所用抗體的濃度取決于每種抗體,抗原的量和所用的檢測方法。通常,稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內,但通常必須憑經驗確定。