genaxxon M3009.0250說明書
產品信息“SNP Pol DNA Polymerase”
SNP Pol DNA聚合酶,用于簡便,可靠和快速的等位基因特異性鑒別,例如。CRISPR / Cas9點突變,用于檢測錯誤的CRISPR / Cas9產物,或驗證測序結果。SNP Pol DNA聚合酶區分高度特異性,是否存在引物 - 模板復合物的錯配。錯配(點突變)必須位于引物的3'末端。因此,突變等位基因可以與野生型等位基因*區分 - 無需測序,因為聚合酶在錯配的情況下不會放大。
只需將您的引物置于假定的點突變上(重要:點突變必須位于3'末端),聚合酶將檢測到該區域的錯配,幾乎100%準確:如果模板堿基與3'末端互補引物顯示突變而引物不顯示,不會發生擴增 - 在短時間內100%確定!
因此,SNP Pol DNA聚合酶可以容易地,時間和成本有效地用于點突變的篩選。
變體SNP PolTaq DNA聚合酶具有5'-3'核酸酶活性,因此可用于特定的水解探針,例如Taqman探針或分子信標。
測試樣品以*出售!德國境內沒有運輸費用。測試樣品價格將在產品的個正式訂單中退還。
描述
SNP Pol DNA聚合酶>(Hi gh Di鑒定單核苷酸)是一種高選擇性的DNA聚合酶。它專門針對需要高鑒別率的等位基因特異性鑒別而開發:例如等位基因特異性PCR(ASA; AS-PCR),等位基因特異性引物延伸(AS-PEX),SNP分析,基因分型或甲基化特異性PCR(MSP)。許多其他DNA聚合酶耐受錯配的引物 - 模板復合物,因此不適合。另一方面,SNP Pol DNA聚合酶特異性地區分這些(高鑒別度)并僅提供具有*匹配的引物對的PCR產物!通過兩個等位基因之間的等位基因特異性PCR,Genaxxon SNP Pol和SNP PolTaq DNA聚合酶的差異高達100%,并且在簡單的qPCR之后,給出關于哪個等位基因存在的清楚結果。從而,
等位基因特異性PCR可用于量化野生型序列的庫或背景中的突變率。由NGS確定的突變頻率的驗證 也可以通過等位基因特異性PCR和SNP Pol DNA聚合酶來驗證。SNP PolTaq DNA聚合酶非常適合分析 液體活檢 樣品。使用SNP PolTaq,可以很好地分析和量化癌癥突變的存在和頻率。
圖片如下:應用說明SNP Pol DNA Polymerase
我們建議設計具有短擴增子長度(約60-200 bp)的引物以獲得良結果,但也可以使用更長的擴增子長度。如果擴增子長> 500 bp,可能需要添加額外的鎂(+0.5-1.5mM)。
SNP Pol DNA聚合酶(M3009> 或 M3061>)可與非特異性熒光染料(例如Genaxxon的 Green DNA Dye> 或SybrGreen®)一起用于實時PCR。當使用特異性PCR探針時,可以僅使用SNP PolTaq DNA聚合酶,因為只有這些具有5'-3'外切核酸酶活性。
我們的高質量dNTP如Set(M3015.4100)> 或 Mix(M3016.1010)> 或我們的 DNA Ladders> 和我們有利的 標準瓊脂糖(M3044)> 我們可以為您的PCR提供其他產品。
SNP Pol DNA和SNP Pol DNA聚合酶的應用領域
- 點突變的監測,驗證和檢測
- 正確或錯誤的CRISPR / Cas9產物
的鑒定
- 測序結果的驗證/驗證- 突變的定量(例如NGS結果)
- SNP檢測等位基因特異性擴增(ASA)/等位基因特異性PCR
- 亞硫酸氫鹽處理DNA后的甲基化特異性PCR(MSP)(CpG甲基化側)
- HLA基因分型
- 微量測序
- 水解探針實時PCR
- 實時多重PCR
- 秀麗隱桿線蟲中的DamID-seq數據。
作為ChIP的替代方案,近顯示通過測序(DamID-seq)鑒定DNA腺嘌呤甲基轉移酶能夠表征單個哺乳動物細胞中的結合位點。另外,通過以受控方式在組織特異性啟動子下表達Dam融合蛋白,可以實現DamID用于細胞類型特異性分析。在本報告中,我們提供了一個用戶友好的管道來分析秀麗隱桿線蟲中的DamID-seq數據。
規格:
SNP Pol DNA聚合酶以5 U /μL溶液形式提供。它配有優化的10倍反應緩沖液。
SNP Pol DNA聚合酶不顯示5'-3'外切核酸酶活性!不適用于與例如TaqMan TM探針的水解探針一起使用。
- 點突變的監測,驗證和檢測 - 正確或錯誤的CRISPR / Cas9產物的鑒定 - 測序結果的驗證/驗證 - 突變的定量(例如NGS結果) - 通過等位基因特異性擴增(ASA)/等位基因的SNP檢測 - 特異性PCR - 亞硫酸氫鹽處理DNA后的甲基化特異性PCR(MSP) - HLA基因分型 - 微量測序 - 實時PCR(無水解探針;使用SNP PolTaq) - 實時多重PCR
REC。來自大腸桿菌
SNP聚合酶是一種高選擇性的DNA聚合酶變異體。它已被選定用于鑒別程度較高的檢測。 例如在等位基因特異性PCRS或甲基化特異性PCRS中。許多dna聚合酶能耐受不匹配的引物-模板復合物,而snp pol dna聚合酶則能有效地鑒別Th。 OSE只在*匹配引物對的情況下產生特定的擴增。這使得SnPol DNA聚合酶在SNP檢測、HLA基因分型或單個CpG分析中非常有用。 加注地點。
SNP Pol DNA聚合酶能有效地區分3‘端不匹配的引物.3‘位錯配引物是識別SNPs的要求. 如果突變/錯配位于引物的另一個位置,SNP POL和SNP PolTaq聚合酶將像“正常”Taq聚合酶一樣工作。
該工程聚合酶也可作為SNP PolTaq DNA聚合酶版本,具有5‘-3’-核酸酶活性,因此可用于基于水解探針的檢測(Taqman探針,molec)
商品概述
濃度:5單位/升
底物類似物:dNTP,ddNTP,熒光dNTP/ddNTP
延伸率:1 kb/min。在72°C
半衰期:20分鐘。95°C,60 min。在94°C
5‘-3’外核酶活性:SNP POL聚合酶NO/SNP PolTaq聚合酶YES)
3‘-5’外核酶活性:NO
核酸酶污染:否
蛋白酶污染:否
單位定義
SNP POL/SNP Poltaq dna-Polymerase的一個單位定義為在72℃下,在72℃下,將10 nmol的dntp酶在30分鐘內加入到酸不溶性組分中的酶量。 .
質量管理
PCR活性:SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶PCR檢測HeLa基因組DNA中的基因組SNP(Rs 72921001)。PCR產物隨后在 2.5%瓊脂糖凝膠。用etSNP溴化Polum染色法在匹配引物的正確擴增長度為109 bp的條件下,觀察到一種特異的產物。在不匹配引物的情況下,不生成產物。 在50個周期后可見。
DNA聚合酶活性:用人工DNA模板和DNA引物監測SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶活性,并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。
適用,應用,運用
·SNP-等位基因特異性擴增(ASA)/等位基因特異性PCR檢測
甲基化特異性PCR(MSP)
·HLA基因分型
·多重PCR
穩定(性),穩固
Genaxxon生物科學SNP POL和SNP PolTaq DNA-聚合酶在濕冰上運輸,但在RT(15°C~25°C)下保持活性至少2周。
SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶(包括緩沖器和試劑)應在收到-20°C時立即儲存,在這些條件下儲存并正確處理,這些產品可以 保持至少到有效期(見管標簽),而不顯示任何性能下降。Genaxxon生物科學SNP POL和SNP Poltaq DNA聚合酶也可在2°C-8保存。 c多3個月。