產品 |
CRM197-1,純化蛋白質,1毫克 |
CRM197-10,純化蛋白質,10毫克 |
CRM197-20,純化蛋白質,20毫克 |
交叉反應材料197(CRM197)是一種基因無毒形式的白喉毒素(DT)。CRM197中的單堿基變化(位置52處的谷氨酸至甘氨酸)使A鏈的ADP-核糖基化活性失效,減弱毒性1,2。盡管CRM197是無毒的,但它在免疫學上與白喉毒素無法區分。CRM197作為多糖和半抗原的載體起作用,使其在許多結合疫苗中具有免疫原性。
圣甲蟲基因組學CRM197是重組形式的清潔基因表達® 大腸桿菌,我們的專有平臺。
SOURCE
清潔基因組® 大腸桿菌中表達的重組CRM197
產品分子量: 58.4 kDa
圖1:Scarab Genomics的CRM197非常純凈,并且在批次之間保持一致。每批Scarab的CRM197的五個重復在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上運行并用GelCode TM Blue染色,然后通過凝膠掃描評估純度。計算每批的平均純度并如下分配:圖A純度98.3%,圖B純度95.5%。
圖2:Scarab Genomics的CRM197純度高于其他商業來源。將來自每種來源的2微克CRM197在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上電泳并用GelCode TM Blue染色。Scarab產品中幾乎不存在分解產物(表示為A和B帶)。一些泳道中的被涂污的背景是由于蛋白質降解和宿主蛋白質的,兩者在Scarab產品中都是小的。泳道1大小標記,泳道2空泳道3 Scarab Genomics CRM197,SG1泳道4 Scarab Genomics CRM197,SG2,Lane 5供應商F,泳道6供應商M和泳道7供應商L.
圖3:Scarab CRM197的LC MS肽圖譜證實它與原生CRM197具有生物學相似性。在Scarab的高純度CRM197上進行氨基酸測序和質譜(MS)。MS材料的廣泛生物信息學分析顯示沒有翻譯后修飾。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化后接著納米液相色譜-MS / MS鑒定出非常高的蛋白質覆蓋率(~97-98%)。Scarab CRM197上的電噴霧電離質譜(ESI-MS)證實了預期的肽序列。沒有觀察到與報道的氨基酸組成和側鏈修飾的差異。
圖4:圣甲蟲的CRM197結合有效。并非CRM197中的所有賴氨酸都暴露在蛋白質表面上以進行潛在的綴合。采用Solulink的ChromaLink™生物素結合測定(San Diego,CA),利用NHS酯反應方案將生物素與伯胺結合,我們證實Scarab的CRM197上至少有10個位點可用于結合。這種光學定量(在354nm處的吸光度)功能測試證實,Scarab的CRM197上的賴氨酸可與半抗原結合,如天然CRM197。
質量控制
純度: | 通過SDS-PAGE檢測≥95%CRM197 |
A鏈和B鏈含量≤總CRM197的5% | |
濃度: | 在150mM NaCl,25mM HEPES,pH7.4中4mg / mL,通過280nm處的吸光度,使用E0.1%= 1.07對1mg / mL溶液 |
內毒素: | 通過動態濁度LAL法≤25EU/ mg蛋白質(大靈敏度= 0.01 EU / mL) |
二聚體: | ≤5% |
等級: CRM197僅供研究使用,不適用于人類或診斷代理。
儲藏條件:
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