smarttubePROT1解凍樣品的解凍方案
加利福尼亞州Smart Tube
一瓶蛋白質組穩定劑。體積足以穩定一百五十五毫升全血樣本。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse,1000X Concentrate”。
所需緩沖區:
1倍水樣(用蒸餾水稀釋1000倍濃縮液,使工作濃度達到1倍)。
緩沖器應在室溫下
染色緩沖液磷酸鹽緩沖液0.5%牛血清白蛋白)緩沖液應在4℃
可能需要的其他緩沖區:
1倍緩沖液2(用蒸餾水稀釋5倍濃縮液,使工作濃度達到1倍)。緩沖器應在室溫下。
禮儀:
如果樣品沒有凍結,因為分析將在同一天進行,請繼續進行第二步。在冷水浴(10°C至15°C)中用攪拌水(即.=‘class 1’>)解凍冷凍樣品.旋轉磁性 攪拌棒或使用軌道震動器)大約20分鐘,直到樣品*解凍。另一種方法是,在4°C冰箱的開式機架中解凍管子大約30分鐘,直到 樣品是*解凍的,不要使用泡沫塑料機架來保存樣品,因為樣品要從-80°C快速過渡到*解凍狀態是很重要的。一旦樣品迅速解凍,m 敬下一步。
加入1倍的SAW-Lyse緩沖液,比例為4:1的穩定樣品(即。如果原始樣本為全血1ml,則加入1.4ml穩定劑,總體積為2.4m 在穩定后,加入至少9.6ml的1xThaw-Lyse緩沖液。將樣品在室溫下攪拌10分鐘。
600×g離心,室溫下離心5分鐘,取白細胞。扔掉上清液。
紅細胞溶解完成后,樣品再懸浮在染色介質中,轉移到FACS管或板上,用染色介質沖洗。將樣品按600 x g離心5次 幾分鐘?,F在可以像用多聚甲醛固定的白細胞一樣對樣品進行染色,使用固定細胞標準染色規程。注意進行細胞內染色 細胞必須用酒精滲透。90%甲醇)或洗滌劑(即。0.2%的皂甙)作為智能管道系統,就像傳統的固定方法一樣,產生細胞膜為s的細胞 可滲透于小分子染料,如碘化丙酸丙酯,但在其他方面是完整的,不提供適當的抗體進入細胞內部,而不經alc進一步滲透。 酒精或洗滌劑。
Lotus公司出品的群件系列軟件
建議在一項研究中對用于解凍樣品的條件(水浴溫度、攪拌和持續時間)進行標準化。
完整的紅細胞溶解通常是在步驟4之后實現的。室溫下穩定時間較長或樣品在4°C(或更高溫度)保溫時間較長 皺縮可能會使紅細胞溶解更加困難。
如果紅細胞溶解在步驟4后未完成,請執行以下步驟:
A1.將球粒置于大于15 ml的1xLyse緩沖液中,在室溫下孵育10分鐘,與原藥丸相同,丟棄上清液。如果球團是白色的,表示紅細胞溶解。 完成后,繼續上面的步驟5。如果沒有,請繼續下面的步驟A2。
A2.將球團置于大于15 ml的1倍Saw-Lyse緩沖液中,在室溫下孵育10分鐘,與以前相同,丟棄上清液。球團應該是相對白色的,表示紅細胞溶解。 S是完整的。繼續執行上面的第5步。
目錄編號 | 新零件號 | 老零件號 | 產品名稱 | 描述 |
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PBS05 | 501351688 | NC0334362 | 智能管基站,標準型號 | 使用多達5個智能管自動化溫度控制孵育和隨后的全血穩定,用于表面表位,磷酸表位,細胞內細胞因子,細胞周期,其他測定的下游單細胞分析。 |
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PROGRAM1P | 501351695 | NC1228060 | 智能管基站編程站 | 編程站是一個手持設備,帶有LCD屏幕和鍵盤以及簡單的用戶界面,用于創建由基站執行的實驗協議(型號PBS05和PBS05-M1V-BSM1)。實驗協議存儲在類似于拇指驅動器的編程密鑰中。包括一個編程密鑰。將編程密鑰插入基站并打開電源會將存儲在編程密鑰上的協議復制到基站。 |
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MTS1P 100 / CS | 501351690 | NC0618265 | 智能管,100箱 | 標準智能管,一百個案例。優化使用1毫升全血。包括THAWLYSE1“Thaw-Lyse,1000X濃縮物”,解凍后儲存在Smart Tubes中冷凍的樣品。還包括用于處理解凍樣品的SERT1“一袋一百(100)個處理插件”。查詢優化的智能管與其他樣品量以及預先裝載生物制劑或感興趣藥物的智能管一起使用。 |
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PROT1 | 501351689 | NC0500838 | Proteomic Stabilizer PROT1,大?。?/span>100個測試 | 一瓶蛋白質組穩定劑。體積足以穩定一百五十五毫升全血樣本。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse,1000X Concentrate”。 |
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PROT1-250ML | 501351692 | NC0627333 | Proteomic Stabilizer PROT1,大?。?/span>250毫升 | 250毫升的Proteomic Stabilizer PROT1瓶。當按照建議使用時,足以穩定超過170毫升的全血。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse,1000X Concentrate”。 |
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PROT1-1L | 501351691 | NC0618275 | Proteomic Stabilizer PROT1,大?。?/span>1升 | 1升一瓶Proteomic Stabilizer PROT1。當按照建議使用時,足以穩定超過700毫升的全血。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品后使用的緩沖液:THAWLYSE1“Thaw-Lyse,1000X Concentrate”。 |
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STBLYSE2-250 | 501351694 | NC1028711 | Stable-Lyse V2緩沖液,大?。?/span>250毫升 | 250毫升Stable-Lyse V2緩沖液瓶。該緩沖液與Stable-Store V2緩沖液結合使用,可存儲全血樣品,在4攝氏度下臨時存儲,在-80攝氏度下長期存放。每250微升全血使用350微升。不得與標準智能管或PROT1蛋白質組穩定劑一起使用。 |
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STBLSTORE2-250 |
| NC1409327 | 穩定存儲V2緩沖液,大小:250毫升 | 250ml瓶裝Stable-Store V2緩沖液。該緩沖液與Stable-Lyse V2緩沖液結合使用,可將全血樣品保存在4攝氏度的臨時儲存中,并在-80攝氏度下長期保存。 |
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STBLSTORE2-1000 | 501351693 | NC1028710 | 穩定存儲V2緩沖液,大小:1000毫升 | 1000ml瓶裝Stable-Store V2緩沖液。該緩沖液與Stable-Lyse V2緩沖液結合使用,可將全血樣品保存在4攝氏度的臨時儲存中,并在-80攝氏度下長期保存。每250微升全血使用1000微升。不得與標準智能管或PROT1蛋白質組穩定劑一起使用。 |
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THAWLYSE1 | 501351696 | NC1255073 | Thaw-Lyse,1000X濃縮液,60毫升 | 60毫升Thaw-Lyse緩沖液,1000倍濃縮液。解凍凍結在PROT1或Smart Tubes中的樣品后使用解凍 - 裂解緩沖液。Thaw-Lyse緩沖液溶解先前在PROT1或Smart Tubes中冷凍的樣品中的紅細胞。該緩沖液以1000倍濃縮液的形式提供。 |
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LYSE2 | 501351697 | NC1255074 | 裂解緩沖液2,5X濃縮物,500毫升 | 當處理預先在PROT1或Smart Tubes中冷凍的全血樣品時,裂解緩沖液2用于任選的第二紅細胞裂解步驟。除非穩定反應時間或溫度偏離標準方案,否則典型的全血樣品不需要該緩沖液。 |
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SERT1 | 501351698 | NC1255075 | 加工插件,100袋 | 一袋一百(100)個處理插頁。處理插入物在解凍先前在智能管中冷凍的樣品后使用。處理插入物用于從智能管中潷析血液樣本。 |
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MTS1PTRAY1 |
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| 用于存放智能管的托盤 | 嵌套熱塑性托盤用于智能管的冷凍庫存。 |
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