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complementtechA120 說明書

 更新時間:2017-09-18 點擊量:1097

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Complement Technology前身是Advanced Research 技術公司,ART公司成立于1993年,是一家有著20多年補體研發和生產經驗的生物制品公司,為用戶提供zui高質量的補體類產品及其它生物試劑產品。公司領導均是有數十年在科研機構從事補體領域研究的科學家,確保了公司產品的地位和*品質。

 

公司主要產品系列:

一、高純補體蛋白產品系列

該產品系列包括多種高度純化的補體蛋白產品,包括C1、C1q、C1q (40% Glycerol)C1r Enzyme、C1s Proenzyme、C1s Enzyme、C1 Esterase InhibitorC2 、C3 C3、C3a C3a desArg、C3b 、iC3b、C3c、C3d 、C4、C4(concentrated)C4a、C4a desArgC4b、C4bC5、C、CC desArg、C5b,6、C6、C7C8、C9SC5b-9 Complex、Factor B 、Factor DFactor H、Factor H (conc.)Factor I、Factor PCobra Venom Factor、Factor BaFactor Bb。

二、過敏毒素產品系列

該系列產品包括C3a、C3a desArgC4a、C4a desArg、CC、C desArg

 

三、特定因子清除的血清產品

該系列產品包括多種通過免疫親和色譜清除補體因子的血清產品,具體包括以下補體清除的血清:C1q-Dpl、C2-Dpl、C3-Dpl、C4-Deficient Guinea Pig、C4-Dpl 、C5-Dpl 、C6-DplC7-Dpl、C8-Dpl、C9-Dpl、Factor B-Dpl、Factor D-Dpl Factor H-Dpl、Factor I-Dpl、Factor P-Dpl、C3/C4 Inactivated Serum、C1q/Factor D-Dpl 。

四、補體相關抗體產品系列

該系列產品為抗補體蛋白的多款抗體產品,適用于多個免疫學及補體研究領域。具體包括Goat Anti-Human C1q、Goat Anti-Human C2、Goat Anti-Human C3 Rabbit Anti-Human C3a、Goat Anti-Human C4、Rabbit Anti-Human C4a、Goat Anti-Human C5、Rabbit Anti-Human rCGoat Anti-Human C6、Goat Anti-Human C7、Goat Anti-Human C8Goat Anti-Human C9、Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)Goat Anti-Human Factor B 、Goat Anti-Human Factor D、Goat Anti-Human Factor H、Goat Anti-Human Factor IGoat Anti-Human Factor P、Goat Anti-Human C1-INH Rabbit Anti-Human Vitronectin。

五、血清產品系列

該產品系列包括正常的人、小型豬、大鼠、小鼠血清產品。

六、補體檢測相關試劑

該系列產品為多種常用的補體研究緩沖液及紅細胞產品:包括GVB緩沖液(含鈣鎂離子或不含鈣鎂離子)、GVBE緩沖液 ( EDTA)、SGVB緩沖液(低離子強度/葡萄糖)、VBS緩沖液 (含鈣鎂離子)、EA (Ab-sensitized sheep E)Es (sheep E)、Er (rabbit E)Zymosan (預活化酵母聚糖) 、MgEGTA緩沖液和MCAR緩沖液。

 

名稱:       C5 Protein          

目錄號:      A120

尺寸:          250μg/瓶

濃度:           1.0 mg / mL (見實際濃度分析證書)

形式:                          冷凍液體

活性:                      >正常人血清標準> 80%。

純度:                         > 95%,通過SDS-PAGE

緩沖液:                        10mM磷酸鈉,145mM NaCl,pH7.2

消光 Coeff進行。        阿 280 納米=  1.03以1.0毫克/毫升

分子量:     190,000 Da(2鏈)

防腐劑:              無,0.22μm過濾

存儲:                      -70 Ò C或以下。避免凍融。 

資源:                       正常 人血清(通過認證測試顯示為陰性

用于 HBsAg,HTLV-I / II,STS,以及針對HCV,HIV-1和HIV-II的抗體)。

注意事項:               使用正常的注意事項處理人體血液制品。

起源:                        在制造美國。

一般說明

天然人C5是含有兩個二硫鍵的鏈的天然糖基化(1.6%)多肽。C5對于形成膜攻擊復合物(MAC)是必需的,并且被所有三種補體激活途徑激活。補體活化的每個途徑產生與靶表面結合的蛋白水解酶復合物(C3 / C5轉化酶)(Ross,GD(1986))。這些酶在C5的較大的α鏈中切割肽鍵,釋放的過敏毒素 C(74個氨基酸)并活化C5b。這是C5b-9復合物組裝中*的蛋白水解步驟。C5b是不穩定的,但是它保持與活化復合物短暫的時間(約2分鐘)結合,在此期間,它將從單獨的C6與周圍的流體結合形成C5b6 ,或者它衰變和聚集,并且不再能夠形成MAC。的體C5b ,6復合物也可以保持結合于C3 / C5轉化酶的單一的C7其中結合公開了一個膜結合區和C5b,6,7-可部分插入到雙脂質靶細胞的層。到目前為止,復合物可以從靶細胞擴散并進入附近細胞的膜。這被稱為旁觀者裂解或“反應性裂解”,可能是病理學的重要來源。每個C5b-7復合物可以結合一個C8蛋白質分子,這導致復合物更牢固地插入到膜中。該復合物結合C9并且每個結合的C9可以結合另外的C9起始形成含有多達18個C9分子的環結構(Podack,ER(1984))。與一個或多個C9的C5b-9復合物被稱為補體的膜攻擊復合物(MAC)。不是所有的C5b-8復合物都有完整的C9環,平均每個C5b-8復合物只有三個C9。C9完成的蛋白質環形成電子顯微照片上看到的孔,并導致代謝物和小蛋白質從細胞中泄漏以及水進入細胞的運動。如果足夠數量插入細胞膜,則由于滲透壓而流入細胞的水會破裂細胞膜,從而釋放靶細胞(或旁觀者細胞)的全部內容物。任一過程都可能導致細胞死亡。原本以為這只需要每個細胞一個C5b-9復合體(簡稱“一擊”理論)(Rommel FA和Mayer,MM(1973)),但這可能是不正確的,例如紅細胞需要大約850個C5b-9復合物,如通過C7分子的數目所測量的,用于裂解發生(Bauer,J。等人(1979))。通過CD59保護免受MAC的宿主細胞需要足夠數量的C5b-9至結合所有的CD59,然后再加上大約850個C5b-9,由于其大小和由于這種細胞中存在多種防御機制,有核細胞的裂解需要更多的C5b-9復合物。                                     

物理特性與結構

分子量:  190,000 Da,由兩個二硫鍵連接。α鏈為115,000Da,β鏈為75,000Da。α和β鏈通過二硫鍵連接。C5 的pI為4.7?5.5。     

由C3 / C5轉化酶切割C5 從α鏈的N末端釋放C(74個氨基酸片段,8268Da脫糖基化,10,400 + 1000個糖基化)。C5b片段(181,000Da)與C6結合以引發膜攻擊復合物的自發組裝。   

 CAS號:  80295-53-0

功能

參見上面的一般說明。

測定

C5的zui簡單的測定法是使用C5耗盡的人血清,并測量作為添加的測試樣品或標準純化C5的濃度的函數的EA(經典途徑)或Er(替代途徑)的裂解。每個*的應用程序可能需要確定適當的條件。然而,典型的測定法將涉及在濕冰上混合25μL含有GVB ++稀釋的C5-Dpl,含有C5的樣品以含有1至10ng C5,以及足夠的GVB ++使體積達到300μL。zui后應添加以GVB ++稀釋的EA(200μL中的3×10 7個細胞)。純化的C5或正常人血清(NHS)可用作C5的來源。將反應混合物在37℃溫育30分鐘ö C和1 毫升加入冷GVBE的。然后將反應混合并離心以將未裂解的細胞旋轉下來。然后在415nm處分析上清液中釋放的血紅蛋白,并與不含C5的空白對照(背景裂解對照),并用275μL水代替GVB ++和25μLC5-Dpl(100%裂解對照)孵育細胞。            

 已經使用預先裝載有C1(EAC1細胞)的EA或經預處理的經典途徑C5轉化酶(EAC1423細胞)描述了許多其它測定法。  然而,所有這些測定都需要使用多種純化的補體成分或更難以準備的試劑(Dodds,AW和Sim,RB(1997); Morgan,BP(2000); Tack,BF等(1981) )。

應用

參見上面的一般說明。

體內

C5的正常血清濃度為75μg/ mL (正常范圍為55?113μg/ mL)。  合成的主要部位是肝臟,但C5也在肺(由II型肺泡細胞),脾,腸,單核細胞和巨噬細胞中制成 。刺激許多其他補體蛋白增加生物合成的細胞因子不影響C5表達水平。C5不是急性期蛋白。   

 許多蛋白質和其他血漿成分對C5b-9復合物的溶解活性具有抑制作用。  大多數可以在C5b-7 期  后與形成復合物相互作用如果含有C5b的復合物不能插入膜中,它們可能自我聚集或結合到zui普遍的S蛋白的調節蛋白。  S蛋白(也稱為玻連蛋白)是一種80,000Da血漿蛋白,與不能插入靶細胞膜的C5b-9復合物結合。這減少對附近宿主細胞的損害。許多其他血清組分抑制或部分地由體C5b-9抑制裂解和這些包括SP40 ,40(也被稱為簇和載脂蛋白 J)和許多血漿脂蛋白復合物(LDL,HDL等)。   

沒有C5b 失活劑對于C3b或C4bBP和因子I對于C4b起到像H和I的因子的作用。  也就是說,C5b不是 通過任何已知的系統蛋白水解轉化成iC5b形式的。

宿主細胞通過各種機制保護自己免受C5b-9的侵害。膜蛋白DAF,MCP和CR1抑制C3 / C5轉化酶的形成,防止MAC形成。CD59,也被稱為“同源限制因子”和“ 保護素 ”,是 細胞膜的 18,000至20,000Da普遍存在的組分,其在結合并抑制 C5b-8和C5b-9復合物的溶解電位方面非常有效。CD59的物種特異性不是的,許多哺乳動物CD59確實抑制或部分抑制其他物種的MAC。觀察到的特異性似乎是由于一種動物的C8與另一種動物的CD59之間的不相容性。像DAF一樣,CD59含有一個GPI錨(一個插入到細胞的膽脂層的翻譯后添加的脂質尾巴)。疾病PNH由附著GPI尾部的酶的喪失引起,從而剝奪細胞使C3 / C5轉化酶失活的能力和使C5b-9失活的能力。這導致對長壽命血細胞如紅細胞和血小板的補體介導的損傷和zui終的裂解。             

 在大多數由IL-1,IL-6,TNF-α和LPS合成C5的細胞中C5的生物合成被上調。

遺傳學

人染色體位置9q 32-34。登錄號M57729。小鼠染色體2. 登錄號J05234。人類基因組結構:該基因跨越79 kb與41個外顯子。     

不足之處

由于在實驗室近交小鼠的育種期間的早期步驟中損失,大量常見的小鼠品系缺乏C5。  六個C5缺陷株是常見的A / HeJ,AKR / J,DBA / 2J,NZB / B1NJ,SWR / J和B10.D2 / oSnJ。  由于在cDNA的5'末端附近存在兩個堿基對缺失,所有缺少C5 。  顯然,生存不依賴于C5或形成MAC的能力,然而,這些小鼠已顯示出許多免疫系統異常,并且通常更易感染許多感染性疾病。類似地,已經報道了幾個C5缺陷家族。C5缺乏的人類具有嚴重受損的殺菌和趨化活性。反復感染是常見的,奈瑟氏球菌屬物種是一個特別嚴重的問題。     

疾病

  見上述缺陷。

注意事項/毒性/危險

這種蛋白質從人血漿中純化,因此必須使用適合于處理任何血液衍生產品的預防措施,即使通過認證測試證明該來源對于HBsAg,HTLV-I / II,STS和HCV抗體是陰性的, HIV-1和HIV-II。       

僅供研究使用。

不適用于人或藥物使用。

 

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